亚洲国产日韩欧美一区二区,少女たちよ在线观看动漫4,久久国产avjust麻豆,欧美成人伊人久久综合网

咨詢熱線

18019981829

當(dāng)前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  Abnbio感受態(tài)細(xì)胞  >  根癌(電擊)感受態(tài)  >  GV3101(pSoup)Electroporation根癌(電擊)感受態(tài)細(xì)胞

Electroporation根癌(電擊)感受態(tài)細(xì)胞

簡要描述:GV3101(pSoup)Electroporation-Competent Cell/ Electroporation根癌(電擊)感受態(tài)細(xì)胞
保存條件:-80℃

  • 產(chǎn)品型號(hào):GV3101(pSoup)
  • 產(chǎn)品品牌:Abnbio
  • 更新時(shí)間:2024-03-27
  • 訪  問  量:466

詳細(xì)介紹

品牌Abnbio貨號(hào)ABN601-50
規(guī)格50支50ul供貨周期現(xiàn)貨
主要用途細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥

GV3101(pSoup)Electroporation-Competent Cell   根癌(電擊)感受態(tài)細(xì)胞

基因型:

C58 (rifR) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( gentR)Nopaline(pSoup-tetR)

簡要說明:

GV3101(pSoup)菌株為C58型背景,核基因中含有篩選標(biāo)簽——li福平抗性基因rif,為了便于轉(zhuǎn)化操作,此菌株攜帶一無自身轉(zhuǎn)運(yùn)功能的胭脂堿型Ti質(zhì)粒pMP90 (pTiC58DT-DNA),此質(zhì)粒含有vir基因 (vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件,pMP90 (pTiC58DT-DNA)質(zhì)粒自身的T-DNA轉(zhuǎn)移功能被破壞,但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體T-DNA順利轉(zhuǎn)移)。pMP90(pTiC58DT-DNA)型Ti 質(zhì)粒含有篩選標(biāo)簽:gent,賦予GV3101菌株qing大霉素抗性;在GV3101菌株中轉(zhuǎn)入help質(zhì)粒:pSoup即為GV3101(pSoup)菌株,可幫助pGreen,62SK,pGs2系列質(zhì)粒在農(nóng)桿菌中復(fù)制,同時(shí)賦予該菌株四環(huán)素(tet)抗性。適用于擬南芥、煙草、玉米、土豆等植物的轉(zhuǎn)基因操作。GV3101(pSoup)電轉(zhuǎn)感受態(tài)特別適用于大質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化:經(jīng)pCAMBIA2301(ka那霉素抗性)質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>105 cfu/μg DNA。

操作說明:

1.0.2cm電擊杯和杯蓋從儲(chǔ)存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘,待其瀝干水分,正置5分鐘,使乙醇充分揮發(fā),待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中,壓實(shí)冰面,電極杯頂離冰面0.5cm以方便蓋上杯蓋,冰中靜置5分鐘充分降溫。

2.取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)插入冰中5分鐘,待其融化,加入1-5ug質(zhì)粒DNA(質(zhì)粒體積不大于6ul,最好用試劑盒抽提,雙蒸水溶解),用手bo打管底混勻,立即插入冰中,用200ul槍頭將感受態(tài)-質(zhì)粒混合物快速移到電擊杯中,蓋上杯蓋,空管保留待用。

3.啟動(dòng)電轉(zhuǎn)儀,設(shè)置參數(shù):C=25uF,PC=200ohm,V=2400V(此參數(shù)為Biorad 推薦,使用者也可按所用電轉(zhuǎn)儀推薦的protocol操作),將電擊杯快速放入電轉(zhuǎn)槽中,電擊完成快速插入冰中,加入700ul 無抗生素的LB并轉(zhuǎn)移到感受態(tài)空管中,28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。

4.6000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天(當(dāng)平板只含有50ug/ml kan 時(shí),28℃培養(yǎng)48h即可;平板中同時(shí)加入50ug/ml kan,20ug/ml rif 時(shí),需28℃培養(yǎng)60h;如果使用的平板含有50ug/ml rif 則需要28℃培養(yǎng)72-90h)。

注意事項(xiàng):

1.加入質(zhì)粒時(shí)體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10 ;質(zhì)粒不純或存在鹽,乙醇等污染,轉(zhuǎn)化效率急劇下降;若轉(zhuǎn)化大質(zhì)?;蛳氆@得較高轉(zhuǎn)化效率,推薦使用高純質(zhì)粒提取試劑盒提取質(zhì)粒。質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個(gè)數(shù)量級。

2.混入質(zhì)粒時(shí)應(yīng)輕柔操作。

3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少最終用于涂板的菌量。

4.li福平濃度不應(yīng)高于25ug/ul,過高的li福平濃度不利于農(nóng)桿菌生長,會(huì)降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率。本公司感受態(tài)計(jì)算轉(zhuǎn)化效率時(shí)所用平板只含有50ug/ml kan,若所用平板含有20ug/ml rif則轉(zhuǎn)化效率降低到1/2。

5.培養(yǎng)基中加入li福平的目的是防止雜菌生長、篩選農(nóng)桿菌;根據(jù)所用菌株抗性加入lian霉素或qing大霉素可防止Ti質(zhì)粒丟失,但lian霉素不利于農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)基因操作,所以一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)不考慮lian霉素或請大霉素,Ti質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略)。




產(chǎn)品咨詢

留言框

  • 產(chǎn)品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯(lián)系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細(xì)地址:

  • 補(bǔ)充說明:

  • 驗(yàn)證碼:

    請輸入計(jì)算結(jié)果(填寫阿拉伯?dāng)?shù)字),如:三加四=7

聯(lián)系我們

合肥恩派爾貿(mào)易有限公司 公司地址:安徽省合肥市高新區(qū)黃山路624號(hào)桑夏精英時(shí)代廣場507室   技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)
  • 聯(lián)系人:李女士
  • QQ:3644884546
  • 公司傳真:4009005473
  • 郵箱:sale@abnbio.com

掃一掃 更多精彩

公眾號(hào)

小程序

欧美日韩精品一区在线播放| 久久精品国产亚洲av网在| 在线观看视频黄| 精品国产一区二区三区电影| 国产区二区三区免费精品| 精品国精品国产自在久国产| 成人精品高清视频在线观看| 欧亚洲嫩模精品一区三区| 天天爱天天干天天操天天射| 久久久久久久久免费视频| 久久久婷婷五月亚洲97号色| 亚洲国产av精品一区二| 男生操女生网站在线观看 | 97久久夜色精品国产九色| 色综合综合在线| 国产呦交小U女精品视频| 是国产爆乳精品合集在线| 精品久久久亚洲男人av| 国产综合亚洲区在线观看| 成人精品短视频在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠躁99| 色综合 亚洲 自拍 欧洲| 国产成人无码精品久久久影院| 色欲色香天天天综合无码www| 国产精品久久久久一区二区三区共| 久久久久久精品免费亚瑟| 无码高潮爽到爆的喷水视频app| 国产精品毛片久久久久久久| 樱花草在线观看播放www| 精品久久久久久亚洲av| 国产精品夫妇激情啪发布| 黄色aa午夜影视在线观看| 久久av午夜一区二区三区| 国产精品色哟哟成人av| 精品久久久中文字幕二区| 天天干夜夜操天天干夜夜操| 日本精品视频在线观看一区| 中文字幕第一页在线资源| 亚洲av手机在线观看。| 午夜免费福利88888| 久久精品国产亚洲一区二区|